1999 SEPTIEMBRE-OCTUBRE, N⁰ 97 VIDA APICOLA /19 – 24/

           El objetivo de los autores en este ensayo fue el de encontrar la forma de no destruir las colonias en­fermas de loque americana, sino recuperarlas mediante diferentes tratamientos divididos en dos fadas: una actividad previa a la aplicacion de quimioterapicos con un metodo que combina la biologia, la tecnologia y la genetica y posteriormente un tratamiento con oxitetraciclina. Con los metodos apli­cados durante la primera fase se consiguio eliminar ya la infeccioin de un gran colmenar en solo tres dias y, tras la aplicacion de los tratamientos quimicos las muestras recogidas para su posterior anali­sis en laboratorio tanto en el ano de ensayo como en el siguiente resultaron negativas (incluyendo cultivos de los panales) para loque americana. El metodo, aunque realizado en condiciones distintas a las espanolas, puede aportar algunas nuevas sugerencias a los lectores.

                                                                                  

   Autor: NAUM BANDZOV (Mr. en apicultura) Fruškogorska 25, Maradik, Yugoslavija - Serbija, E - mail: bandzov@neobee.net

          

 Colaboradores: DJ. DJERMANOVIC VD. KELARIC (Instituto Veterinario Zemum),    D. SUVAKOV, N. PLAVSA, M. MRDJEN (Instituto Veterinario Novi Sad), M. MALJKOVIC (Inspector provincial), Z. LOVRENOVIC (apicultor),I. BORSOS (titular de la explotacion de ensavo)

                                                                   

                                  

 

 

 

 La loque americana (AFB, siglas del nom­bre en ingles, American foulbrood) se ha convertido en un problema de ambito mundial debido a una legis­laci6n poco clara y a la he­terogeneidad de la practica veterinaria. La erradicaci6n de los focos de AFB en Yu­goslavia y Macedonia diri­gida a sanear los colmena­res en que se ha diagnosti­cado AFB se basa en la eliminacion de todas las colmenas infectadas lo que sup one quemarlas y ente­rrarlas, incluyendo abejas y panales, y tanto si son de cuadros moviles como fijos.

El Manual de Veterinaria de 1989, valido para Yugos­lavia y Macedonia, preve en su capitula XI, paginas 701-­702 (autores: Dr. Nikola Fi­jan y Dr. Djuro Sulimano­vić) la curacion de la enfer­medad par tratamiento con medicinas y seleccion. Ba­sados en esta posibilidad hemos introducido un nue­vo metodo que combina, la tecnologfa, la biologfa y la genetica.

De acuerdo con las reco­mendaciones de los trabajos de Park (1936-1937) la crfa muerta con loque es elimina­da de los cuadros de crfa gra­cias al comportamiento hi­gienico de las abejas. Este comportamiento de limpieza ha si do confirmado par S.Taber (1982), J. Kulince­vić y W.C. Rothenbuhler (1982), D. Newton y N.Os­tariewski (1985) en Apis me­llifera ligustica y N.Band­zov (1990) en Apis mellifera carnica (con abejas proce­dentes de la zona de Skopje en Macedonia).

Se ha descubierto tambien que las larvas muertas re­cientemente no son suscep­titles al estado vegetativo del patogeno (Tarr, 1937) y que la rapida extracci6n de las larvas enfermas del nido de crfa antes del perfodo de esporulacion ayuda a con­trolar AFB (Woodrow y Hoist, 1942).

Es sabido que existen co­lonias de abejas resistentes a AFB en mayor o menor grado (Rothenbuhler, 1967; Kulincevic y Rothenbuhler, 1982; Bandzov, 1990). Ba­sandose en esta caracterfsti­ca se podrfan criar abejas mas resistentes a AFB me­diante seleccion.

 

  

       

 

Woodrow (1942) prob6 que larvas de diferentes edades manifestaban dife­rencias en su habilidad para resistir a Bacillus larvae.

La efectividad de la con­ducta higienica de las abe­jas se acrecienta durante el flujo de nectar (Mamot y Rothenbuhler, 1971) Y el suministro de jarabe de azu­car estimula tambien esta conducta (Thomson, 1964; Murer,1964).

Sturtevant y Ravel (1953) observaron que las abejas aislan hasta un 79% de las esporas de Bacillus larvae gracias al trasiego del nec­tar antes de colocarlo en los cuadros. Thompson y Rot­henbuhler (1957) compro­baron la conducta higienica de extracci6n de las esporas del alimento destinado alas larvas, tambien par trasiego de la miel.

Las investigaciones de la infecci6n con esporas de AFB y celulas vegetativas hechas par Tarr (1937), los estudios sabre la existencia de esporas de AFB en la miel extrafda durante seis afios hechas par Hansen y Rasmunsen (1986), asf co­mo el informe aportado par N.Bandzov en el Simposio Internacional de Zagreb de 1986, apuntaban las fatales consecuencias de la presen­cia de pequefias cantidades de esporas en una colonia de abejas, contrariamente a las anteriores presunciones.

Todos estos conocimien­tos previos sabre AFB y su eliminaci6n nos hall esti­mulado en nuestra invC!sti­gaci6n de dos afios en Rimski Sancevi y Maradik para ensayar un nuevo me­to do de lucha contra AFB, el metodo tecnoI6gico-bio­16gico-genetico, que ha su­puesto la introducci6n de nuevas soluciones al crear "colmenas aisladoras" con cuadros infectaqos, consi­guiendo recuperar las abejas j6venes para luego redistri­buirlas y mejorar estructura de la poblaci6n y la conduc­ta higienica. Se podrfa decir en lenguaje biol6gico que practicamos una "transfu­si6n de abejas jovenes".

 

 

Las investigaciones se hall realizado cerea de Novi Sad, en Rimski Sancevi en un colmenar de 56 colo­nias, desde el 8 de julio de 1995 hasta el 3 de septiem­bre de 1996 cuando hici­mos los ultimos analisis microbiologicos.

Las colmenas eran del tiro Langstroth con de uno a tres cuerpos y medias alzas. Una vez revisadas las 56 colmenas y encontramos mediante examen clfnico la presencia de AFB en 52 de ellas, con diferentes grados de infestaci6n que iban de 1 a 16 cuadros. Solo en 4 col­menas no encontramos nin­guna manifestacion de la enfermedad. Los autores comprobamos microscopi­camente la presencia de Ba­cillus larvae en nuestro lab oratorio particular de Maradik. Informamos al Instituto Veterinario de No­vi Sad acerca de la existen­cia del colmenar afectado par AFB y una comision se presento para comprobar su existencia mediante exa­men clfnico.

 

 

Realizamos el tratamiento durante el perfodo del 14 al 17 de julio. Extrajimos todo el excedente de miel acu­mulado en las colmenas (130 kilos).

El tratamiento se dividio en dos fases, la primera de las cuales correspondfa a los apartados tecnologico y biologico del metodo. Del total de 52 colmenas enfer­mas extrajimos 580 cuadros infectados. En 330 de ellos no encontramos larvas ni crisalidas sanas mientras sf que se apreciaban la'rvas muertas par AFB. Se proce­dio a fundir la cera y a la desinfeccion de los cuadros. Esta ultima se realizo me­diante una rasqueta y poste­rior flameado. Una vez de­sinfectados pusimos cera estampada nueva en esos cuadros.

Con los restantes 250 cua­dros en que existfan larvas y crisalidas vivas no enfermas junta con abejas vivas sin reina formamos cinco "col­menas aisladoras" (colme­pas con una o varias alzas ) con 50 cuadros cada uno.

Debido a la fuerte infesta­cion par Varroa colocamos cinco tablillas impregnadas con fluvalinato coma trata­miento. Las "colmenas ais­ladoras" se mantuvieron par 21 dfas hasta que todas las abejas jovenes y sanas na­cieron; estas abejas se dis­tribuyeron progresivamente entre las colonias que habf­an presentado mayor infec­cion y estaban mas debij..es (es decir, de las cololllas donde habfamos extrafdo los cuadros infectados), con el fin de compensar la falta de abejas jovenes que la en­fermedad habfa producido y reponer la proporcion de 2 : 1 entre abejas jovenes y adultas, mejorando asf tam­bien la conducta de limpie­za y previniendo nuevos re­brotes de AFB. Posterior- mente enviamos dichos cuadros para ser fundidos, desinfectados y provistos de cera nueva, coma habiamos hecho anteriormente.

Los cuadros de las alzas y cuerpos de crfa fueron re­emplazados par otros pre­viamente desinfectados. Los cuadros de los que se habia extraido miel (108) y los que no tenian muestras de infeccion par AFB y ca­recfan de cria fueron deja­dos juntas con las abejas en colmenas nuevas desinfec­tadas. Anadimos tantos cua­dros coma fueran necesa­riDs en funcion de las abejas existentes. Cuando el nu­mero de cuadros era insufi­ciente colocabamos cuadros desinfectados provistos de cera estampada.

Tras el tratamiento dividi­mos las 52 colmenas de las que se habian extraido cua­dros infectados en tres gru­pas y se les asignaron nue­vas identificaciones:

* Grupo debil. 12 colme­nas con de I a 3 cuadros de cria cada una y un minima de tres a cinco espacios in­tercuadros ocupados. Nu­meradas ahora de I a 12.

* Grupo media. Compues­to par 25 colmenas con de 4 a 5 cuadros de crfa cada una y un minima de 5 a 7 espa­cios intercuadros ocupados. Numeradas de 13 a 37.

* Grupo fuerte.15 colme­nas con de 7 a 9 cuadros de cria cada una y un minima de 8 a 10 espacios intercua­dros ocupados. Numeradas de 38 a 52

A las cuatro colmenas no infectadas se les asignaron los numeros 53 a 56.

El metodo hasta ahora descrito podria asimilarse en medicina veterinaria a una operacion quirurgica de eliminacion de tejidos (col­menas) enfermos.

La enfermedad en este gran colmenar se controlo en tres dfas y pudimos enrOllees pasar a la segunda fase, el usa de quimioterapicos.

 

 

La segunda fase del tratamiento consistio en la apli­cacion de oxitetraciclina pa­ra prevenir posteriores in­fecciones de las larvas me­nares de 24 horas, que son contaminadas en un porcen­taje del 44,15% (las larvas de entre 24 y 48 horas 10 son en un 4,8%, mientras que las mayores de 48 horas de­vi en en resistentes a la infec­.cion; Woodrow, 1942).

Preparamos el medica­menta antibiotico Vesemy­cin AT cuyo principio activo es la oxitetraciclina* (* En nuestro pais existen igual­mente preparaciones comerciales de oxitetraciclina conocidas par to­dos los apicultores.) y apli­camos 75 mg de la sustan­cia activa par colmena di­sueltos en jarabe de azucar al 50%. Preparamos cada dia la cantidad de jarabe medicinal suficiente y 10 aplicamos en dos maneras diferentes:

* Introduciendo el jarabe en el alimentador de las col­menas fuertes (aquellas que no habfan perdido la pro­porcion generacional), de 200 a 500 ml cada dfa du­rante los siguientes treinta dfas (15 dosis provistas de medicamento y quince do­sis adicionales de jarabe co­rriente).

* Aplicando entre 100 Y 200 ml de jarabe con pulve­rizadar sabre los cuadros y las abejas en las colmenas mas debiles (aquellas que habfan perdido su estructu­ra generacional). A estas colonias les anadimos abe­jas jovenes procedentes de los "colmenas aisladoras" y asi mejaramos progresiva­mente su estructura genera­cional hasta hacerlas capa­ces de consumir el jarabe medicinal del alimentador sin ayuda.

Al cabo de un rues el col­menar podia considerarse curado par completo, asi que paralizamos la adminis­tracion de medicamentos. Ninguna de dichas colmenas ha recibido ni un apice de medicamento hasta la fecha actual, ya que no soy parti­dario de la aplicacion pre­ventiva de medicamentos a las colonias sanas (como di­ce el Dr. Wilson: "darles me­dicamentos alas colonias sa­nas esta prohibido"). Como fadnaceutico soy competente para afirmar que cada me­dicamento dado a un arga­nismo sano, en particular los antibioticos, supone admi­nistrarle un toxico.

De las cuatro colmenas no infectadas, numero 53, 54, 55 y 56, tomamos material vivo para la produccion de 80 reinas el 20 de julio del ano del tratamiento. Este material se llevo para su crfa y fecundacion al col­menar de los autores en Ma­radik, a 30 km del colmenar tratado, y en el que desde 1986 se crian abejas reinas con buenos comportamientos de limpieza. Fuimos uti­lizando estas reinas nuevas con excelente comporta­mien to limpiador para criar y reemplazar las reinas mas debiles con peores caracte­risticas.

 

 

Se realizaron pruebas de la­boratorio en diferentes muestras del colmenar an­res de los tratamientos con resultado positivo a loque americana, Varroa jacobso­ni, Ascosphaera apis y No­sema apis.

Durante la primera fase del tratamiento, en el perfo­do del 14 al17 de julio, 52 colonias recibieron jarabe medicinal par dos veces. El flujo de nectar file bueno y aporto diariamente entre 600 y 1200 g con Un prome­dio de 800 g. Junto a los cuadros ya existentes (557) anadimos 210 cuadros con cera estampada que fueron rapidamente estirados y lle­nados de puesta.

La segunda fase del trata­miento se prolongo desde el 19 dejulio hasta el12 de agosto y las 52 colmenas fueron tratadas con jarabe medicinal trece veces.

El inspector veterinario provincial acudio dos veces durante la segunda fase del tratamiento al colmenar, el 28 de julio y el 11 de agosto e inspecciono 26 colmenas escogidas segun su criteria; ninguna de ellas manifesto ninguna clase de sfntomas de AFB. En esta segunda fase del tratamiento anadi­mos 180 cuadros con cera estampada. El autor y sus ayudantes realizaron 13 ins­pecciones de control y nin­gun sfntoma de AFB file puesto de manifiesto.

Cuando iniciamos los pre­parativos para la invernada el 15 de agosto reemplaza­mos las 25 reinas mas debi­les con arras tantas nuevas de las colonias "resistentes".

Tres meses despues de la primera diagnosis de AF:rr: el P de septiembre, un in­vestigador del Instituto Ve­terinario de Novi Sad extra jo cinco nuevas muestras de panal con crfa de 10 x 10 cm. de manera aleatoria de las col men as mlmero 5, 13, 18, 35 y 38 para realizar un diagnostico microbiologi­co.

    

Ademas realizo una ins­pecci6n de campo de diez colmenas mas y no observo sfntomas de AFB. Los re­sultados de los examenes microbiologicos realizados en el laboratorio dieron po­sitivo a Varroa jacobsoni en la colmena numero 4 y ne­gativo a loque americana para las 5 muestras; el culti­vo in vitro del panal resulto tambien negativo.

Entre los dfas 6 y 10 de oc­tubre preparamos para la in­vernada 50 colmenas y seis nucleos. 48 col- menas supe­raron el invierno. Las 8 muertas fue par hambre. El 2 de abril del ano siguiente realizamos una inspeccion detallada y ninguna colonia manifestaba sfntomas de AFB. El colmenar propor­ciono 800 kg de miel, 80 reinas, 20 enjambres, se obraron 800 cuadros con cera estampada y quedaron 60 colmenas listas para pa­sar la siguiente invernada.

En ese ano reemplazamos las 31 reinas restantes por nuevas madres.

El 26 de agosto del segun­do ana, de nuevo el Instituto Veterinario de Novi Sad controlo 15 colmenas a pe­ticion nuestra, escogidas se­gun su libre eleccion. No encontro ningun signa de AFB en su inspeccion.

 Tomo asimismo muestras de panales con cr!a de cinco colmenas diferentes (3, 8, 21, 27 y 35) para realizar su amilisis en ellaboratorio. El resultado file negativo en las cinco muestras, tanto para AFB, as! coma para los cultivos in vitro realizados.

 

Las investigaciones desa­rrolladas en esta investiga­cion indican que AFB pue­de ser eliminada par com­pleto mediante el metodo biotecnologico- genetico combinado con la aplica­cion del antibiotico oxite­tracic1ina en muy pequenas dosis y durante un corto es­pacio de tiempo.

A pesar de que la erradica­cion de AFB en Yugoslavia y Macedonia esta oficial­mente dentro de las compe­tencias de los servicios ve­terinarios, es de todos cono­cido que los apicultores usan antibioticos y otros medicamentos segun sus conocimientos propios, a menudo usando medica­mentos nocivos y/o dosifi­caciones incorrectas aplica­das de forma asimismo in­correcta. Por el contrario, nuestro metodo de elimina­cion de AFB presenta una muy importante innovacion comparado con los metodos anteriores empleados en Yugoslavia: la seleccion de las abejas. Lo pear es la filosoffa de la legislacion vi­gente: "Destruye y quema".

Hemos solicitado de Api­mondia que considere la po­sibilidad de crear una nueva doctrina veterinarja mun­dial sabre la erradicacion de AFB de man era que rompiendo con la mentalictad desfasada del "Destruye y quema" entremos en la nue­va mentalidad del siglo veintiuno de "previene, sal­va y saca provecho."

 

Dada la extension de las re­ferencias bibliograficas es­tas se hall omitido de esta reproduccion, quedando, sin embargo, a disposicion de quienes las necesiten pa­ra sus investigaciones en nuestra editorial.

 

­      El tratamiento con quimioterapicos se realize con oxitetracilina aplicado bien en forma de jarabe de alimentacion en las colmenas mas fuertes, bien pulverizando este jarabe en los panales en las colmenas mas debiles